細(xì)胞凋亡檢測試劑盒Cell counting KIT-8 （CCK-8）日本原裝

保存 ：4℃密封避光保存，有效期一年。

產(chǎn)品簡介 ：
    Cell Counting Kit-8 簡稱 CCK-8 試劑盒，為 MTT 法的替代方法，是一種基于 WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名： 2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽） 的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)

使用說明 ：
一 、 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 （ 測定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí)）
    1、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞。
    2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度，一般要做 3-5 個(gè)細(xì)胞濃度梯度，每組 3-6 個(gè)復(fù)孔。
    3、接種后培養(yǎng)細(xì)胞貼壁，然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時(shí)間后測定 OD 值，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X 軸） ，OD 值為縱坐標(biāo)（Y 軸）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量（試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實(shí)驗(yàn)的條件要*，便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時(shí)間。 ）
二 、 細(xì)胞活性檢測
    1、在 96 孔板中接種細(xì)胞懸液（100µL/孔） 。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（在 37℃,5% CO 2 的條件下） 。
    2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響 OD 值的讀數(shù)） 。
    3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。
    4、用酶標(biāo)儀測定在 450nm 處的吸光度。
    5、如果暫時(shí)不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。
三 、 細(xì)胞增值- 毒性檢測
    1、 在 96 孔板中配置 100 µL 的細(xì)胞懸液。 將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時(shí) （在 37 ℃， 5% CO2 的條件下） 。
    2、 向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)。 在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間 （例如： 6、 12、 24 或 48 小時(shí)） 。
    3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響 OD 值的讀數(shù)） 。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基） ，去掉藥物影響。
    4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。
    5、用酶標(biāo)儀測定在 450 nm 處的吸光度。
    6、如果暫時(shí)不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。

活力計(jì)算：.
    細(xì)胞活力（％）=[A(加藥)－A(空白)]／[ A(0 加藥)－A(空白)]×100
    A（加藥） ：具有細(xì)胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度
    A（空白） ：具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度
    A（0 加藥） ：具有細(xì)胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
    細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力

注意事項(xiàng) ：
    ①建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。
    ②白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
    ③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn) 96 孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的小接種量少為 1 ,000 個(gè)/孔 (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于 2,500 個(gè)/孔 ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實(shí)驗(yàn)，請先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。
    ④如果沒有 450nm 的濾光片，可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片，但是 450nm 檢測靈敏度高。
    ⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí)，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會(huì)對檢測造成影響。

CCK-8法與其它檢測法之間的比較

相關(guān)產(chǎn)品 ：

M1020  MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
P1020  1×PBS，PH7.2-7.4，0.01M，細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
H1020  Hanks，含鈣鎂，含酚紅（HBSS）
H2045  EBSS（不含鈣鎂，不含酚紅 ）
12100  DMEM(H)
S9000  特級(jí)胎牛血清
P1400  青鏈霉素混合液(100×)

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1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運(yùn)輸說明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。