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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-微量法微量法生化試劑盒BC0405-100T/96S胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

推薦
若使用96孔板測(cè)定,需使用96孔UV板,推薦貨號(hào)YA0602
英文名稱
Isocitrate Dehydrogenase Cytoplasmic(ICDHc) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)

產(chǎn)品型號(hào):BC0405-100T/96S

更新時(shí)間:2025-08-26

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1092

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010-50973130

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產(chǎn)品介紹


胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
貨號(hào):BC0405
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體120 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一粉劑×12-8℃保存
試劑二粉劑×12-8℃保存
試劑三粉劑×12-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑一:用時(shí)加入20 mL提取液溶解;

  2. 試劑二:用時(shí)每支加275 μL雙蒸水充分溶解備用;

  3. 試劑三:用時(shí)每支加275 μL雙蒸水充分溶解備用;

  4. 工作液配制:將試劑一、試劑二、試劑三按85:11的比例混合,現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說明:
ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時(shí)還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細(xì)胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會(huì)發(fā)生顯著變化。
利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng),在340nm下測(cè)定NADPH濃度的增加,即可反映ICDHc活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):

  1. 若A2-A1大于0.5,需將酶液用提取液稀釋,使A2-A1小于0.5,可提高檢測(cè)靈敏度。若初始值A1大于0.5可嘗試將酶液用提取液稀釋。

  2. 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑二、試劑三和樣本在冰上放置,以免變性和失活;工作液37℃水浴放置。

  3. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。

  4. 最好兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn),一個(gè)人比色,一個(gè)人計(jì)時(shí),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g稗草,加入1mL提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g 4℃離心10min,取上清,之后按照測(cè)定步驟操作,用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA=A2-A1=0.2285-0.2139=0.0146,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

ICDHc活性(U/g 質(zhì)量)=1608×ΔA÷W=234.768 U/g 質(zhì)量。

  1. 0.1g小鼠腎組織,加入1mL提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g 4℃離心10min,取上清稀釋10,之后按照測(cè)定步驟操作,用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA=A2-A1=0.5989-0.1263=0.4726,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

ICDHc活性(U/g 質(zhì)量)=1608×ΔA÷W×10=75994.08 U/g 質(zhì)量。
參考文獻(xiàn):

  1. Miake F, TORIKATA T, KOGA K, et al. Isolation and characterization of NADP+-specific isocitrate dehydrogenase from the pupa of Bombyx mori[J]. The Journal of Biochemistry, 1977, 82(2): 449-454.

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BC1120/BC1125  NADP蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測(cè)試劑盒
BC1130/BC1135  NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)活性檢測(cè)試劑盒
BC2100/BC2105  6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)活性檢測(cè)試劑盒

 胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法 胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法


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