胰*白酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2315
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前加入0.5mL蒸餾水，充分溶解；

2. 工作液的配制：將試劑一、試劑二按2：97配制工作液，按需配制，實驗前置于37℃水浴預熱20min以上。

產(chǎn)品說明：
胰*白酶選擇性水解變性蛋白質中由賴氨酸或精*酸的羧基所構成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰*白酶還廣泛應用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
胰*白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過測定253nm 吸光度增加速率，即可計算出胰*白酶的活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

1. 實驗前用1～2個樣做預實驗，保證吸光值變化在0.01～0. 15之間（若使用96孔UV板，變化范圍在0.01-0.08之間）。

2. 若所測結果ΔA測定為負值，可適當將試劑一稀釋（2倍或4倍）再進行實驗。

實驗實例：

1. 取1.25mg/mL胰*白酶溶液，按照測定步驟操作，使用96孔UV板測得計算ΔA測定=A4-A3=0.363-0.344=0.019，ΔA空白=A2-A1=0.325-0.324=0.001，按樣本質量計算酶活得：

胰*白酶（U/mg prot）=2×10⁵×(ΔA測定-ΔA空白) ÷Cpr =2880 U/mg prot。
相關發(fā)表文獻：

1. Ren Zhang,Ruolun Wei,Wei Du,et al. Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA-593-5p to modulate human glioma growth via polo-like kinase 1. CNS Neuroscience & Therapeutics. March 2019;(IF4.458)

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