土壤有效硼含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC3025
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入12mL蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑可以2-8℃保存四周；

2. 試劑三：臨用前取1瓶加入6mL蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑可以2-8℃保存一周；

3. 試劑五：臨用前取1瓶加入2mL蒸餾水充分溶解，再加入0.5mL試劑三混勻，用不完的試劑可以2-8℃保存二周；

4. 標(biāo)準(zhǔn)品：10mg硼酸。臨用前加入0.81mL蒸餾水充分溶解，配制成200μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待用，用不完的試劑2-8℃可保存兩周。

產(chǎn)品說(shuō)明：
硼是植物正常發(fā)育的微量元素，能夠促進(jìn)植物生長(zhǎng)茂盛和生殖器官的正常發(fā)育。根據(jù)土壤有效磷含量，合理供給硼元素是提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)的關(guān)鍵措施之一。
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物，在420nm有特征吸收峰，即可計(jì)算土壤有效硼含量
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0141μmol/mL
線(xiàn)性范圍：0.015625-2μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、冰、蒸餾水、30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

• 樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可參考文獻(xiàn)）

1. 新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱烘干，過(guò)30-50目篩。

2. 按照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為1：5-10的比例（建議稱(chēng)取約0.2g土樣，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，沸水中浸提10min。

3. 自然冷卻至室溫，加入50μL試劑一，震蕩5min。

4. 加入100μL試劑二，震蕩3min。

5. 加入100μL試劑三，充分震蕩褪去紫色。

6. 8000g，25℃離心10min，取上清液待測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至420nm，分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋?zhuān)簩?00μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水倍比稀釋至1.5、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液備用，標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：

備注：實(shí)驗(yàn)中需標(biāo)準(zhǔn)品40µL。

1. 樣本測(cè)定：

三、土壤有效硼的計(jì)算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：

以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為x軸（x，μmol/mL），各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的吸光度為y軸（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，建立標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將ΔA（y，ΔA測(cè)定）帶入方程得到x（μmol/mL）。

1. 土壤有效硼計(jì)算：

有效硼含量（mg/kg土樣）=10.81×x×V樣總÷1000÷（W÷1000）=13.51×x÷W
W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：樣本總體積，1.25mL；10.81：硼分子量，10.81μg/μmol；1000：?jiǎn)挝粨Q算系數(shù)，1mmol=1000μmol，1kg=1000g。


注意事項(xiàng)：

1. 顯色時(shí)嚴(yán)格控制溫度并且避光，以免顯色劑見(jiàn)光分解。

2. 如果測(cè)定吸光值超過(guò)線(xiàn)性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取約0.2g處理好的土樣，加入1mL蒸餾水，按照樣本處理步驟操作，離心取上清之后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A空白管=0.210-0.146=0.064，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)y=0.9827x+0.0033，得出x=0.0618，按計(jì)算公式計(jì)算有效硼含量得：

有效硼含量（mg/kg土樣）=13.51×x÷W=13.51×0.0618÷0.2=4.1746mg/kg土樣。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC2980/BC2985土壤有效硫含量檢測(cè)試劑盒
BC2950/BC2955酸性土壤速效磷含量檢測(cè)試劑盒

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