儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱(chēng)
肉桂酸-4-羥化酶活性檢測(cè)試劑盒其他系列
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱(chēng)
Cinnamic acid 4-hydroxylase(C4H) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑，詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào)：BC4080-50T/48S

更新時(shí)間：2024-04-12

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問(wèn) 量：783

服務(wù)熱線(xiàn)

010-50973130

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產(chǎn)品分類(lèi)

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線(xiàn)粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

肉桂酸-4-羥化酶（C4H）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法
貨號(hào)：BC4080
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱(chēng)	規(guī)格	保存條件
提取液	液體60mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體40 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2瓶	2-8℃保存
試劑三	粉劑×2瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：臨用前取一瓶粉劑加入3 mL乙醇溶解備用。2-8℃保存4周。
試劑三：臨用前取一瓶粉劑加入3 mL雙蒸水充分溶解待用?，F(xiàn)配現(xiàn)用。-20℃分裝可保存4周，避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說(shuō)明：
C4H又稱(chēng)反式肉桂酸-4-單氧化酶，是催化桂皮酸形成咖啡豆、香豆酸的酶。C4H多存在于高等植物、酵母、菌類(lèi)中，屬于細(xì)胞木質(zhì)素合成途徑中間的關(guān)鍵酶。
C4H催化肉桂酸和NADPH生成4-香豆酸鹽和NADP，在340nm下測(cè)定NADPH的減少速率，即可反映C4H活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、乙醇、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
1、組織：稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。12000g， 4℃離心15分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
2、細(xì)胞或細(xì)菌樣本的制備：先收集細(xì)胞或細(xì)菌樣本到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率200w，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）。12000g，4℃離心15min，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟

紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min，波長(zhǎng)調(diào)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
加樣表（在1mL石英比色皿中分別加入）

試劑名稱(chēng)（μL）	測(cè)定管
試劑一	700

試劑二	100
試劑三	100
樣本	100

充分混勻后立即測(cè)定10s時(shí)在340nm下的吸光度，記為A1，之后迅速將其放入37℃水浴或37℃培養(yǎng)箱中3min。然后迅速拿出擦凈后測(cè)定190s時(shí)的吸光度，記為A2。計(jì)算ΔA=A1-A2。

注意事項(xiàng)：
當(dāng)ΔA大于0.4時(shí)，建議將樣本用提取液稀釋后測(cè)量；ΔA過(guò)小時(shí)，建議增加酶促反應(yīng)時(shí)間（5min或10min）或增加加入的樣本體積來(lái)測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g黃豆（發(fā)芽）加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA=A1-A2=1.643-1.510=0.133，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：C4H酶活（U/g質(zhì)量）=535.91×ΔA÷W=535.91×0.133÷0.1=712.76 U/g 質(zhì)量。