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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法糖代謝系列BC4390-50T/48SD-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝

D-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

有效期
6個(gè)月
儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
D-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝
單位

英文名稱
D-Xylose Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào):BC4390-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-16

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :877

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

D-木糖含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào):BC4390

規(guī)格:50T/48S

產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

提取液

液體55 mL×1

2-8℃保存

試劑一A

粉劑×4

常溫保存

試劑一B

液體80 mL×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一的配制:臨用前取一瓶試劑一A加入20mL試劑一B,溶解后備用,2-8℃保存1周,若試劑變黃色則已經(jīng)變質(zhì),不能繼續(xù)使用。

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg木糖。臨用前加入1 mL蒸餾水配制成10mg/mL木糖標(biāo)準(zhǔn)溶液備用,2-8℃保存4周。

產(chǎn)品說(shuō)明:

木糖是一種戊糖。天然D-木糖是以多糖的形態(tài)存在于植物中。木糖可以活化人體腸道內(nèi)的雙岐桿菌并促其生長(zhǎng),雙歧桿菌是益菌,該菌越多越有益人體健康,食用木糖能改善人體的微生物環(huán)境,提高機(jī)體的免疫能力;同時(shí)木糖在小腸上段吸收后不參與體內(nèi)的代謝,經(jīng)腎臟排出。因此,D-木糖的吸收一直作為小腸吸收不良的重要功能指標(biāo)。

D-木糖在強(qiáng)酸條件下水解產(chǎn)生糠醛,糠醛可與間 苯*反應(yīng)生成粉紅色化合物,在554 nm處有特殊吸收峰,據(jù)此可由吸光值計(jì)算出樣本中木糖的含量。

 

技術(shù)指標(biāo):

低檢出限:0.0007 mg/mL

線性范圍:0.0039-0.4 mg/mL

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、鼓風(fēng)烘箱、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、30-50目篩、EP管、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)

1、植物樣本:將供試的植物樣本在65℃的鼓風(fēng)烘箱中烘干,研磨成粉狀,過(guò)30-50目篩。按質(zhì)量(g):提取液體積(mL1 : 50~100比例(建議稱取20mg烘干樣本,加入1.0 mL提取液),渦旋混勻,在100℃水浴鍋中準(zhǔn)確水解2 h。然后10000 rpm,室溫離心15 min,棄沉淀,取上清液待測(cè)。

 

2、組織樣本:按質(zhì)量(g):提取液體積(mL1 : 5~10比例(建議稱取0.1g樣本,加入1.0 mL提取液),研磨勻漿后,在100℃水浴鍋中準(zhǔn)確水解2 h,然后于10000 rpm,室溫離心15 min,棄沉淀,取上清液待測(cè)。

3、血清(漿)等液體樣本:直接測(cè)定。

二、測(cè)定步驟

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至554 nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至0.4、0.25、0.1250.0625、0.03125、0.015625、0.0078mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

3、 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:

序號(hào)

稀釋前濃度(mg/mL

標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL

蒸餾水體積(µL

稀釋后濃度(mg/mL

1

10

100

900

1

2

1

200

300

0.4

3

1

250

750

0.25

4

0.25

500

500

0.125

5

0.125

500

500

0.0625

6

0.0625

500

500

0.03125

7

0.03125

500

500

0.015625

8

0.015625

500

500

0.0078

備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需200µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4、 操作表(在1.5mL EP管中操作):

試劑名稱(μL

測(cè)定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

樣本

200

-

-

標(biāo)準(zhǔn)品溶液

-

200

-

蒸餾水

-

-

200

試劑一

1000

1000

1000

    渦旋混勻,準(zhǔn)確沸水浴8minEP管蓋緊并用封口膜密封,避免水分散失影響體系,冰浴冷卻至常溫,測(cè)定554nm下的吸光度A,分別記為A測(cè)定管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管,計(jì)算ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A空白管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)1-2次。

三、D-木糖含量的計(jì)算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(x,mg/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(y,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測(cè)定(y,ΔA測(cè)定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(x,mg/mL。

2、D-木糖含量的計(jì)算:

1)植物中木糖含量(mg/g=x×V提取÷W1=x÷W1

2)組織中木糖含量(mg/g=x×V提取÷W2= x÷W2

3)血清(漿)木糖含量(mg/mL= x×V÷V=x

V樣:加入樣本體積,0.2 mL;V提?。杭尤胩崛∫旱捏w積,1 mL;W1:植物樣本的質(zhì)量,g;W2:組織樣本的質(zhì)量,g。

 

注意事項(xiàng):

1、如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。

2、試劑一B因有強(qiáng)烈刺激性氣味,過(guò)多吸入對(duì)人體有害,故建議在通風(fēng)櫥中進(jìn)行操作。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

1、 稱取0.05g衛(wèi)矛莖加入0.5mL提取液進(jìn)行樣本處理,取上清后稀釋2倍按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得并計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A空白管=0.639-0.002=0.637,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=2.3529x+0.0015,計(jì)算x=0.27,按照公式計(jì)算得:

植物中木糖含量(mg/g=x×V提取÷W1×2(稀釋倍數(shù))=0.27×0.5÷0.05×2=5.4 mg/g。

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC2620/BC2625  β-木糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒

BC2690/BC2695  葡萄糖脫氫酶(GCDH)活性檢測(cè)試劑盒

BC4290/BC4295  N-乙?;?/span>-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性檢測(cè)試劑盒

 

D-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝 D-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝

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