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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法輔酶Ⅱ系列BC1120-50T/48SNADP蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測試劑盒 輔酶

NADP蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測試劑盒 輔酶
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
NADP蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測試劑盒 輔酶
有效期
6個月
單位

英文名稱
NADP Malic Enzyme(NADP-ME) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號:BC1120-50T/48S

更新時間:2024-04-24

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :2227

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產(chǎn)品介紹


NADP-蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號: BC1120
規(guī)格: 50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體70 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體40 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×12-8℃保存
試劑三粉劑×22-8℃保存
試劑四粉劑×2-20℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:用時加入20 mL提取液充分溶解備用;

  2. 試劑三:用時加入用時每支加1 mL雙蒸水充分溶解備用;

  3. 試劑四:用時每支加500 μL雙蒸水充分溶解備用;

  4. 工作液:在15 mL試劑二中加入2 mL試劑三和1 mL試劑四,可以根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說明:
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生*酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測定NADPH增加速率。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項:

  1. 若A2-A1大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A2-A1小于0.5,可提高檢測靈敏度。

  2. 實驗時,試劑三、試劑四和樣本在冰上放置,以免變性和失活。試劑一37℃或25℃水浴放置。

  3. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。

  4. 最好兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  5. 如果ΔA0.01,可將反應(yīng)時間延長到5分鐘或10分鐘。

實驗實例:

  1. 取0.1g肝加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清,按照測定步驟操作,測得計算ΔA=A2-A1=0.924-0.637=0.287,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

NADP-ME(U/g 質(zhì)量)=4823×ΔA÷W=4823×0.287÷0.1=13842.01 U/g 質(zhì)量。

  1. 取0.1g蒜加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清,按照測定步驟操作,測得計算ΔA=A2-A1=0.171-0.135=0.036,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

NADP-ME(U/g 質(zhì)量)=4823×ΔA÷W=4823×0.036÷0.1=1736.28 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
[1] Baohua Zhu,Ruihao Zhang,Nana Lv,et al. The Role of Malic Enzyme on Promoting Total Lipid and Fatty Acid Production in Phaeodactylum tricornutum. Frontier in Immunology. June 2018;(IF4.716)
參考文獻(xiàn):
[1] Spampinato C P, Colombo S L, Andreo C S. Interaction of analogues of substrate with NADP-malic enzyme from maize leaves[J]. Photosynthesis research, 1994, 39(1): 67-73.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0260/BC0265 6-磷酸葡萄糖脫氫酶G6PDH活性檢測試劑盒
BC0400/BC0405 胞漿異檸檬酸脫氫酶ICDHc活性檢測試劑盒
BC2100/BC2105 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶6PGDH活性檢測試劑盒

NADP蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測試劑盒 輔酶  NADP蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測試劑盒 輔酶


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