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專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號(hào)：BC5910-50T/48S
更新時(shí)間：2024-04-23
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：1722
010-50973130
產(chǎn)品分類
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高鐵螯合物還原酶（FCR）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號(hào)：BC5910
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 2-8℃保存 | |
試劑三 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 顯色液：臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑一：試劑二：試劑三=250μL：250μL：250μL（750μL，1T）的比例配制顯色液，充分混勻，現(xiàn)配現(xiàn)用；
2、 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入0.71mL蒸餾水和10μL濃硫酸，配制成50μmol/mL Fe2+標(biāo)準(zhǔn)液。溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品2-8℃可以保存2周。
3、 62.5nmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：臨用前取50μL 50μmol/mL Fe2+標(biāo)準(zhǔn)液和950μL蒸餾水混合配制成2.5μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液；再吸取25μL 2.5μmol/mL（2500nmol/mL）和975μL蒸餾水混合配制成62.5nmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
產(chǎn)品說明：
雙子葉植物和非禾本科單子葉植物采用鐵螯合還原反應(yīng)的高效活化和吸收機(jī)制從土壤中獲取鐵。三價(jià)鐵還原為二價(jià)鐵后才能被植物吸收利用。在鐵充足時(shí)，植物根部的三價(jià)鐵氧化還原酶將Fe(III)-螯合物中的鐵還原并將還原所得Fe2+轉(zhuǎn)運(yùn)通過細(xì)胞質(zhì)膜進(jìn)入根細(xì)胞內(nèi)。
高鐵螯合物還原酶（Ferric chelate reductase，FCR，EC1.16.1.7）催化Fe3+還原為Fe2+，F(xiàn)e2+和菲洛嗪形成紫色絡(luò)合物，在562nm下有特征吸收峰。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、分析天平、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、濃硫酸（95%-99% AR）、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體的操作步驟請(qǐng)見“產(chǎn)品資料"文件
注意事項(xiàng)：
1、 如果?A小于0.010或測定管吸光值接近空白管，可以增加樣本量或者延長反應(yīng)時(shí)間后再進(jìn)行測定；如果?A大于1或者A1大于1，建議將樣本上清用提取液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。注意同步修改計(jì)算公式。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1、 稱取0.1214g櫻桃番茄，加入提取液進(jìn)行冰浴勻漿，按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得計(jì)算ΔA= A2-A1=0.921-0.082=0.839，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.723-0.044=0.679，帶入公式計(jì)算：
FCR活性(U/g 質(zhì)量) =2.083×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=21.020 U/g 質(zhì)量
2、 稱取0.1002g閩南葉片，加入提取液進(jìn)行冰浴勻漿，按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得計(jì)算ΔA= A2-A1=0.203-0.088=0.115，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.723-0.044=0.679，帶入公式計(jì)算：
FCR活性(U/g 質(zhì)量) =2.083×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=3.521U/g 質(zhì)量
參考文獻(xiàn)：
[1] Shabnam N , Kim M , Kim H .Iron (Ⅲ) oxide nanoparticles alleviate arsenic induced stunting in Vigna radiata[J].Ecotoxicology and Environmental Safety, 2019, 183(Nov.).
[2 Kabir A H , Akther M S , Skalicky M ,et al.Downregulation of Zn-transporters along with Fe and redox imbalance causes growth and photosynthetic disturbance in Zn-deficient tomato[J].Scientific Reports, 2021, 11(1).
[3] Ojeda M , Schaffer B , Davies F S .Root and Leaf Ferric Chelate Reductase Activity in Pond Apple and
Soursop[J].Journal of Plant Nutrition, 2005, 27(8):1381-1393.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC4340/BC4345 亞鐵氧化酶（HP）活性檢測試劑盒
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